行凶的凶嫌已知是29歲的馬丁（Omar Mateen），據「洛杉磯時報」（LA Times）報導，警方說，馬丁行凶是早有預謀的恐怖攻擊，他是在酒吧接近打烊的時刻開槍掃射。
有目擊者說，混亂中凶嫌至少開了40槍，持續的槍聲像乒、乒、乒，更有嚇壞的目擊者說，槍響幾乎是延續整首歌曲的長度，而爆發槍擊的當下，在酒吧狂歡的人群有的摔在地上或在地上爬找掩蔽，也有人躲進廁所裡。
有個在廁所裡的身分不明男子發簡訊給他媽媽，當地電視台WFTV-TV披露簡訊內容，「他進來了」、「我快要死了」、「他跟我們都在廁所裡」，隨後就沒有消息，生死未卜。
凶嫌與警方數度交火，隨後凶嫌退回酒吧內又挾持人質超過3小時，奧蘭多警方在推特頁面，公布一張員警頭盔被子彈打穿的照片，可見歹徒火力強大。